Trpa染色液

货号：B0032
品牌：博尔夫生物
价格：350
规格：50次




TRAP染色反应 抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)为破骨细胞的特异性标志酶，应用偶氮偶联组化分析法酶活性部位显示红色反应。以萘酚二磷酸盐为底物，偶氮副品红为显色剂，TRAP在酒石酸钾钠存在条件下将萘酚AS-BI磷酸盐水解为萘酚AS-BI，与显色剂结合形成红色沉淀"。常用于破骨细胞染色。破骨细胞被染成酒红色。



1、石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min，自来水漂洗，蒸馏水洗三遍。
2、染液：A液：醋酸缓冲液
      B液：六偶氮副品红(临用前亚硝酸钠(B1)与副品红溶液(B2)等比例混合)
      注：副品红4℃棕色瓶保存。
      C液：萘酚AS-BI磷酸盐（C1）0.02g+NN-二甲基酰胺(C2)1ml
孵育液配制：B液1ml+A液18ml+C液1ml混匀，再加酒石酸钾钠(D)0.282g，充分溶解即为TRAP孵育液。
3、染色：切片用组化笔画圈，滴加TRAP孵育液置于37℃孵育1-2h，蒸馏水洗，镜下观察破骨细胞呈酒红色。
4、苏木素染细胞核：切片入苏木素染1-3min，自来水洗，盐酸水溶液分化数秒，自来水冲洗，氨水水溶液返蓝，流水冲洗。
5、脱水封片：切片依次放入无水乙醇I 5min -无水乙醇II 5min-无水乙醇Ⅲ5min -正丁醇5min-二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min透明，将切片从二甲苯拿出来稍晾干，中性树胶封片。
6、显微镜镜检，图像采集分析。
三、结果判读：破骨细胞胞浆呈酒红色，核浅蓝色。



4℃，保存一年。



1、染液配制过程中需充分溶解，且染液要现配现用；
2、苏木素复染核浅染，以不影响阳性为原则。